家蝇细胞色素P450还原酶的原核表达与活性鉴定

摘要：

目的 家蝇是重要的卫生害虫,其抗药性问题突出,其中细胞色素P450介导的代谢解毒作用增强是其抗药性的重要机制.细胞色素P450还原酶(cytochrome P450 reductase,CPR)是细胞色素P450酶系的重要组分,建立家蝇细胞色素P450还原酶(MdCPR)表达体系有助于通过重组家蝇细胞色素P450酶系以鉴定家蝇抗药性的生物化学机制.方法 将家蝇CPR基因的编码区克隆到表达载体(pB508)上构建重组质粒,在大肠埃希菌中重组质粒经异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对表达的MdCPR蛋白进行细胞定位分析和活性测定.结果 MdCPR蛋白在大肠埃希菌中成功地得到表达,分子质量为76×103左右,表现出细胞色素C还原酶活性,主要定位在细胞的膜成分中.结论 在大肠埃希菌中表达了具有还原酶活性的MdCPR蛋白,为进一步研究家蝇细胞色素P450的功能及其在抗药性中的作用奠定了基础.

关键词：家蝇、细胞色素P450还原酶、功能表达、活性检测

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分类号：R384.2;S481+.4(医学寄生虫学)

资助基金：北京市自然科学基金5142014Supported by the Municipal Natural Science Foundation of Beijing of China No.5142014

在线出版日期：2016-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：121-123