实时荧光PCR检测Nam Dinh病毒方法的建立及初步应用

摘要：

目的 建立一种快速、特异检测Nam Dinh病毒(NDiV)的实时荧光PCR方法.方法 根据GenBank和本实验室分离的NDiV进行序列比对,找出保守序列(RdRp)并设计特异引物和TaqMan-MGB探针,通过调整引物、探针浓度,优化其反应条件,对方法做灵敏度、特异性、稳定性实验,以评价反应体系.结果 NDiV的TaqMan-MGB实时荧光PCR检测方法用时短,灵敏度高,最低检测下限为0.1PFU.与登革热1～4血清型病毒、流行性乙型脑炎、人呼吸道合胞病毒、轮状病毒、星状病毒、腺病毒无交叉反应,特异性良好;将4份核酸含量不同的标准样品重复检测5次,平均Ct值变异系数范围为1.67％～3.68％,稳定性较高.通过监测,龙岗区蚊虫携带NDiV概率为18.00％.结论 NDiV的TaqMan-MGB实时荧光PCR方法是一种快速、特异、灵敏、稳定性好的方法,可应用于流行病学环境监测,提高病毒的快速检测能力.

关键词：Nam Dinh病毒、实时荧光定量PCR、TaqMan-MGB探针、应用

所属期刊栏目：26

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广东省自然科学基金2014A030313583;Supported by the Natural Science Foundation of Guangdong Province No.2014A030313583

在线出版日期：2015-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：447-450