10.11853/j.issn.1003.4692.2015.02.007
实时荧光RT-PCR法快速检测三带喙库蚊中的流行性乙型脑炎病毒
目的:从四川省成都地区采集三带喙库蚊样品,快速检测蚊虫中的流行性乙型脑炎病毒(JEV),并确定JEV基因型别。方法采用实时荧光RT?PCR方法检测蚊体内的JEV。利用一步法RT?PCR试剂盒扩增阳性样品PrM区段特异性核苷酸序列,测序后应用Clustal X1.83和Mega 5.0软件构建系统进化树,并进行基因分型和同源性分析。结果2012年采集三带喙库蚊雌蚊10656只,分为219份,检测出7份JEV阳性核酸样品,阳性率为3.2%。扩增PrM区域特异性核苷酸序列674 bp,经鉴定均为基因Ⅰ型。与国内外部分GⅠ型的相关序列比较,核苷酸同源性为91.5%~100%,氨基酸同源性为94.9%~100%,其中与四川省SC09-X08株同源性最高。结论实时荧光RT?PCR法能快速检测三带喙库蚊中的JEV,成都地区存在基因Ⅰ型JEV流行。
三带喙库蚊、流行性乙型脑炎病毒、实时荧光RT-PCR、基因分型、同源性分析
R384.1;R373.3(医学寄生虫学)
2015-04-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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