粉尘螨变应原第1组分原核表达质粒pCold-TF-Der f1构建及鉴定
目的 建立粉尘螨变应原第1组分全长基因原核表达质粒pCold-TF-Derf1.方法 以质粒pET-28a(+)-Derf1为模板扩增目的基因Der f 1,克隆至pCold-TF DNA载体,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达并用SDS-PAGE(十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)和蛋白印迹法( Western blotting,WB)验证产物.结果 PCR扩增获得Derf 1编码全长基因,成功构建表达质粒pCold-TF-Derf 1,SDS-PAGE和WB验证表明该质粒在大肠埃希菌中正常表达,且基本为可溶性表达.结论 成功建立尘螨变应原原核表达质粒pCold-TF-Derf1,并成功实现其原核表达,为进一步生产基因工程变应原提供基础依据.
尘螨变应原、基因重组、原核表达
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R384.4(医学寄生虫学)
国家自然科学基金30660166;NSFC81001330;盐城市科技发展计划项目YK2008079;江苏省卫生厅招标课题Z200914;江苏省卫生职业技术教育研究立项课题J200907;江苏省"六大人才高峰"第六批项目
2012-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
289-291
