尘螨变应原Der p 2基因克隆及原核表达

摘要：

目的 原核表达尘螨主要变应原Der p 2.方法 分离屋尘螨总RNA,根据GenBank已公布的Der p 2核酸序列设计引物用RT-PCR扩增Der p 2编码基因,克隆至pMD19-T载体、亚克隆至表达载体pET28a(+),将表达质粒转化至Escherichia coli BL21(DE3)并用IPTG诱导表达,并对表达产物进行免疫印迹鉴定.结果 成功构建了表达质粒pET28a(+)-Der p 2,SDS-PAGE和Western blotting显示原核表达获得成功.序列分析表明所获得的Der p 2编码基因与参考序列同源性达99.54%,推测其编码氨基酸130个,相对分子质量约为14 348.5.结论 尘螨变应原Der p 2原核表达获得成功,为进一步生产重组变应原奠定了基础.

关键词：尘螨、Der p 2、克隆、原核表达

所属期刊栏目：19

分类号：R384.4(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金2005-80556;海南省卫生厅科研课题琼卫2005-6号

在线出版日期：2008-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：320-323