10.3969/j.issn.1003-4692.2008.04.006
利用正交试验法建立德国小蠊羧酸酯酶的最佳反应体系
目的 为了系统地研究德国小蠊羧酸酯酶(CarE)的性质,确定其抗药性的发生和发展及其抗性水平,建立适宜的快速、准确的酶活性检测方法.方法 用正交试验方法研究酶液浓度、底物浓度、反应体系的pH值、反应温度、反应时间5个因素对德国小蠊CarE活性的影响,并从试验组合中选出最优的条件组合.对正交试验结果进行极差和方差分析.结果 实验结果表明,影响德国小蠊CarE比活力的5个因素中各因素水平之间差异有统计学意义.A因素(酶浓度)的最优水平是酶的浓度为0.35只/ml;B因素(底物浓度)的最优水平是底物浓度为0.6 mmol/L;C因素(反应时间)的最优水平是反应时间为5 min;D因素(反应温度)的最优水平是酶反应温度为40℃;E因素(反应体系的pH值)的最优水平是酶液反应体系的pH值为6.5.极差和方差分析结果表明A4B3C1D4E2是最优组合,利用此组合测得的CarE比活力最高为37.286 μmol(mg pro·min).各因素对试验结果影响的顺序为:反应温度>反应时间>底物浓度>酶浓度>pH值.结论 确定了测定德国小蠊CarE活性的最佳反应条件是:酶浓度为0.35只/ml;底物浓度为0.6 mmol/L;反应时间为5 min;反应温度为40℃;酶反应体系的pH值为6.5.
德国小蠊、羧酸酯酶、正交试验、方差分析、最佳条件
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R384.9(医学寄生虫学)
2008-09-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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