10.3969/j.issn.1003-4692.2006.06.015
TaqMan荧光定量RT-PCR快速检测登革1、2型病毒
目的 建立特异、灵敏、快速的荧光定量RT-PCR方法用于检测登革1、2型病毒核酸,并初步应用于登革热的临床标本检测.方法 根据GenBank登录的登革热毒株序列,应用生物学软件进行序列比对,分别在登革病毒1型的NS5基因和2型的C基因的保守区设计特异性引物和TaqMan探针.对荧光定量RT-PCR反应条件进行优化,验证该方法的特异性、灵敏度和稳定性.同时对疑似登革热病例血清标本进行检测.结果 该方法对登革1、2型病毒的检测有高度的特异性,与登革病毒的4个血清型之间以及流行性乙型脑炎病毒、肾综合征出血热病毒等均无交叉反应,检测的灵敏度均达0.1 TCID50,可从疑似登革热病例血清标本中直接检测登革病毒核酸,从病毒核酸提取至完成检测仅需3 h左右.结论 本研究建立的TaqMan荧光定量RT-PCR是一种快速检测登革1、2型病毒特异、敏感的方法,适用于临床早期诊断.
荧光定量RT-PCR、TaqMan探针、登革病毒
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R373.33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
浙江省科技厅科技计划2001136
2007-01-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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