10.3969/j.issn.1005-9202.2023.20.061
circTLK1靶向miR-16-5p对MPP+诱导的帕金森病模型细胞损伤的影响
目的 探讨circTLK1 对 1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病(PD)模型细胞损伤的影响及其可能作用机制.方法 采用MPP+诱导人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH建立PD模型记为PD组;用脂质体法分别将si-阴性对照(NC)、si-环状RNA(circTLK)1、miR-NC、miR-16-5p mimics、si-circTLK1+anti-miR-NC、si-circTLK1+anti-miR-16-5p转染至SK-N-SH细胞,转染成功后建立PD模型记为 PD+si-NC组、PD+si-circTLK1 组、PD+miR-NC组、PD+miR-16-5p组、PD+si-circTLK1 组+ anti-miR-NC组、PD+si-circTLK1+anti-miR-16-5p组.qRT-聚合酶链反应(PCR)法检测circTLK1、miR-16-5p的表达量;利用试剂盒检测丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的水平;流式细胞术测定细胞凋亡;双荧光素酶报告实验验证circTLK1 与miR-16-5p的靶向关系;Western印迹测定蛋白切割型(cleaved)-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、cleaved-caspase9 表达.结果 与Con组比较,PD组circTLK1 的表达量和MDA的水平增加,凋亡率和蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase9 水平增加,miR-16-5p的表达量和GSH的水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与PD+si-NC组比较,PD+si-circTLKL组MDA水平、凋亡率和蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase9 水平降低,GSH水平增高,差异均有统计学意义(P<0.05);circTLK1 可靶向调节miR-16-5p的表达.与PD+si-circTLK1 组+anti-miR-NC组比较,PD+si-circTLK1+anti-miR-16-5p组MDA水平、凋亡率和蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase9 水平增加,GSH水平和miR-16-5p表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 干扰circTLK1 表达可减轻MPP+诱导的神经细胞氧化应激及凋亡从而改善PD模型细胞损伤,其机制与靶向上调miR-16-5p表达相关.
circTLK1、miR-16-5p、帕金森病(PD)、氧化应激、凋亡
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R742.5(神经病学与精神病学)
张家口市科学技术;地震局项目
2023-10-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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