LncRNA H19通过调控心肌纤维化进程促进急性心肌梗死

摘要：

目的 通过人源心肌成纤维细胞分析长链非编码RNA(LncRNA)H19 对纤维化进程的影响,并探讨其在纤维化进程中的分子调控机制.方法 通过血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导人源心脏成纤维细胞(HCFs)纤维化,转染si-H19、miR-130a-3p inihibitor、pcDNA3.1-Ⅰ型TGF-β受体(TGFBR1)至细胞,以转染NC为对照.实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测H19、miR-130a-3p和TGFBR1 的表达.通过CCK-8 检测细胞的增殖活力变化;细胞划痕实验检测细胞的迁移能力变化;West-ern印迹检测纤维化相关蛋白胶原蛋白(Collagen)Ⅰ、CollagenⅢ和α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达.通过生物信息学网站(http://www.csbio.sjtu.edu.cn/)预测及RNA-FISH、核质分离实验验证H19 的亚细胞定位.Starbase数据库双荧光素酶切报告实验与RNA pull-down实验验证H19 和miR-130a-3p与miR-130a-3p和TGFBR1 的结合.结果 AngⅡ处理的HCFs中H19主要表达于细胞质中,高表达的H19 通过结合miR-130a-3p抑制其表达,促进TGFBR1 的表达.AngⅡ处理后,HCFs增殖活力及迁移能力显著增加,CollagenⅠ、CollagenⅢ和α-SMA表达显著上调(P<0.001).敲低H19 的表达后,miR-130a-3p表达显著增加,TGFBR1 表达显著减少,HCFs 增殖活力及迁移能力显著降低,CollagenⅠ、CollagenⅢ和 α-SMA 表达显著下调(P<0.001).抑制miR-130a-3p的表达或上调TGFBR1 的表达均能部分逆转敲低H19 后细胞增殖、迁移能力及纤维化蛋白的变化.结论 LncRNA H19 通过竞争性结合miR-130a-3p,调节TGFBR1 的表达,促进心肌纤维化进程.

关键词：急性心肌梗死、心肌纤维化、LncRNA H19、miR-130a-3p、TGFBR1、增殖活力、迁移能力、纤维化蛋白

所属期刊栏目：43

分类号：R43

资助基金：衡水市科技计划项目15020

在线出版日期：2023-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：4529-4534