CHIP介导的OGG1在老年性白内障发展过程中作用

摘要：

目的 探讨热休克蛋白70 羧基末端反应蛋白(CHIP)介导的8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG)1 在老年性白内障发展过程中的作用.方法 培养SRA01/04 永生化人晶状体上皮细胞,分为空白对照组、空载体质粒转染组、CHIP过表达质粒转染组、细胞氧化损伤模型组.免疫沉淀实验检测OGG1 蛋白的泛素化修饰及与E3 泛素连接酶CHIP的结合能力.使用手持中波紫外线检测灯照射建立细胞氧化损伤模型,通过转染CHIP质粒提升其表达,Western印迹检测细胞中OGG1 蛋白表达变化.结果 免疫沉淀实验结果显示,晶状体上皮细胞中存在OGG1 蛋白的泛素化修饰;UbiBrowser软件预测CHIP可能是引发OGG1 泛素化修饰的E3 泛素连接酶.Western印迹检测结果显示,CHIP能够与OGG1 相互结合,提示OGG1 可能参与了OGG1 蛋白的泛素化修饰过程.在中波紫外线照射10 min时,晶状体上皮细胞中CHIP蛋白相对表达量明显低于其他中波紫外线照射时间;在中波紫外线照射20～40 min时,随着照射时间的增加,晶状体上皮细胞中CHIP蛋白相对表达量逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05).根据后续实验建立的细胞氧化损伤模型均选用中波紫外线照射 10 min后,再孵育 24 h.CHIP过表达质粒转染组晶状体上皮细胞中CHIP蛋白相对表达量明显高于空载体质粒转染组和空白对照组(P<0.05);细胞氧化损伤模型组晶状体上皮细胞中OGG1 蛋白相对表达量明显高于空白对照组(P<0.01);CHIP过表达质粒转染组上述指标明显低于细胞氧化损伤模型组、空载体质粒转染组(P<0.05).结论 E3 泛素连接酶CHIP可诱发OGG1 泛素化降解,造成晶状体上皮细胞中损伤性DNA聚集,导致老年性白内障的发生与发展.

关键词：老年性白内障、人晶状体上皮细胞、E3泛素连接酶、热休克蛋白70羰基末端反应蛋白(CHIP)、8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG)1

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分类号：R776.1(眼科学)

资助基金：湖南省教育厅科学研究项目;衡阳市指导性计划项目

在线出版日期：2023-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：4234-4237