利拉鲁肽对高糖介导人牙周膜成纤维细胞的影响

摘要：

目的 研究利拉鲁肽(Lira)对高糖介导人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)凋亡及Wnt/连环蛋白β(CTNNB)1 通路的影响及机制.方法 体外复苏培养hPDLFs,取对数生长期的hPDLFs调整其密度为5×108 个/L.对照组hPDLFs在常规培养基中培养[含 11 mmol/L 葡萄糖(GLU)],甘露醇组 hPDLFs 在含有 19.5 mmol/L 甘露醇培养基中培养,高糖组在含40 mmol/L GLU的培养基中培养,Lira组在含有40 mmol/L GLU和100 nmol/ml Lira的培养基中培养.3 d后利用CCK-8 法检测各组细胞活力,利用Hoechst染色检测细胞凋亡情况同时利用比色法检测各组hPDLFs凋亡相关指标含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3、6、9 活性,检测各组hPDLFs内游离Ca2+浓度,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测测各组hPDLFs上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-3 和 MMP-9 表达,采用实时荧光定量 PCR 及 Western 印迹检测各组 hPDLFs 中Wnt3a、CTNNB1、Bcl2 相关X蛋白(Bax)、重组人B细胞淋巴瘤因子2XL(Bcl-xl)的mRNA和蛋白表达.结果 与对照组和甘露醇组比较,高糖组hPDLFs凋亡率及细胞内游离Ca2+浓度显著增加,细胞活力显著降低(P＜0.05),Caspase3、6、9 活性和细胞上清液中MMP-2、MMP-3 和MMP-9 浓度显著升高(P＜0.05),Wnt3a、CTNNB1 及Bax mRNA和蛋白水平均表达显著升高,Bcl-xl mRNA和蛋白表达显著降低(P＜0.05).与高糖组比较,Lira 组hPDLFs凋亡细胞数目显著减少,细胞内游离Ca2+浓度显著降低,细胞活力显著升高(P＜0.05),Caspase3、6、9 活性显著降低,细胞上清液中MMP-2、MMP-3 和MMP-9 浓度显著降低(P＜0.05),Wnt3a、CTNNB1 及Bax mRNA和蛋白表达显著降低,Bcl-xl mRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.05).结论 Lira对高糖介导的hPDLFs损伤具有保护作用,降低细胞凋亡率,促进细胞增殖,其机制可能通过抑制Wnt/CTNNB1 通路激活,抑制下游靶基因Bax,促进Bcl-xl的表达实现的,并且抑制细胞Caspase活性及上清液中MMP相关蛋白的释放.

关键词：利拉鲁肽、人牙周膜成纤维细胞、高糖、凋亡、Wnt/连环蛋白β(CTNNB)1通路

所属期刊栏目：43

分类号：R329.2(人体形态学)

在线出版日期：2023-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3550-3554