10.3969/j.issn.1005-9202.2023.12.039
miR-214-3p通过靶向MFN2诱导胃癌细胞线粒体分裂及凋亡的机制
目的 探讨miR-214-3p靶向MFN2 诱导胃癌细胞及线粒体分裂凋亡的作用及机制.方法 收集 43 对胃癌组织及癌旁正常组织,采用基因芯片筛选胃癌组织及癌旁正常组织中差异表达的miRNAs并通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测差异表miRNAs表达水平;此外,使用SGC7901 细胞进行功能验证及机制研究,分为阴性对照(NC mimic)组,过表达miR-214-3p(miR-214-3p mimic)组,过表达miR-214-3p和线粒体融合蛋白(MFN)2(miR-214-3p mimic+MFN2)组,过表达miR-214-3p和线粒体抑制剂处理(miR-214-3p mimic+Mdivil)组;RT-qPCR检测miRNAs及MFN2 表达;CCK-8 实验检测细胞活力;TUNEL实验检测细胞凋亡;活性氧(ROS)、线粒体膜电位、三磷酸腺苷(ATP)及线粒体通透性转换孔检测线粒体功能;Western印迹检测细胞色素C、促凋亡蛋白[半胱氨酸蛋白酶(caspase)3,B细胞淋巴瘤(Bcl)-2 相关X蛋白(Bax)]和抗凋亡蛋白Bcl-2,MFN2 蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因检测miR-214-3p与MFN2 的靶向调控关系.结果 与癌旁组织相比,芯片结果显示胃癌组织中差异倍数>2 的10 个miRNAs,其中胃癌组织中miR-214-3p表达明显降低;此外,与NC mimic组相比,miR-214-3p mimic组明显抑制细胞增殖,促进了细胞线粒体分裂及细胞凋亡,并抑制了MFN2 的mRNA和蛋白的表达;双荧光素酶报告基因结果证明了miR-214-3p与MFN2 靶向结合抑制荧光素酶活性;与miR-214-3p mimic组相比,同时过表达MFN2 或使用Mdivil明显促进了细胞增殖,抑制了线粒体分裂及细胞凋亡,促进了MFN2 的mRNA和蛋白的表达.结论 miR-214-3p通过靶向并抑制MFN2 表达,从而促进线粒体分裂并诱导胃癌细胞凋亡.
胃癌、miR-214-3p、MFN2、线粒体分裂、凋亡
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R739.41(肿瘤学)
海南省卫生健康行业科研项目20A200432
2023-06-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
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