10.3969/j.issn.1005-9202.2022.23.037
LncRNA XLOC_036125-Lgmn-Beclin-1轴在STEMI中的功能
目的 探究LncRNA XLOC_036125-Lgmn-Beclin-1轴在造影剂所致急性肾损伤中的影响及机制.方法 构建大鼠肾小管细胞CI-AKI模型.转染LncRNA XLOC_036125稳定过表达载体/LncRNA XLOC siRNA干扰细胞水平LncRNA XLOC表达量,采用RT-qPCR和Western印迹实验观察LncRNA XLOC_036125对Lgmn基因及蛋白表达水平的影响;采用双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA XLOC_036125和Lgmn靶向作用关系.采用GST-pull down实验检测Lgmn蛋白与Beclin-1蛋白之间相互作用关系;构建Lgmn稳定过表达重组质粒载体及Lgmn siRNA,采用RT-qPCR和Western印迹实验观察Lgmn对Beclin-1基因及蛋白表达水平的影响.同时采用RT-qPCR和Western印迹实验观察LncRNA XLOC_036125对Beclin-1基因及蛋白表达水平的影响,探究LncRNA XLOC_036125调控Lgmn与Beclin-1参与自噬过程的作用.结果 与空载质粒对照组比较,LncRNA XLOC_036125重组质粒组HK-2细胞中,Lgmn mRNA及蛋白表达明显增高(P<0.05);与siRNA对照组比较,Ln-cRNA XLOC_036125 siRNA组HK-2细胞中,Lgmn mRNA及蛋白表达则明显降低(P<0.05);LncRNA XLOC_036125和Lgmn存在靶向结合关系;在HK-2细胞中,Lgmn蛋白与Beclin-1蛋白存在靶向结合关系,转染Lgmn稳定过表达重组质粒后,HK-2细胞中Beclin-1 mRNA及蛋白表达明显增高(P<0.05),转染Lgmn siRNA后,HK-2细胞中Beclin-1 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);与空载质粒对照组比较,LncRNA XLOC_036125重组质粒组HK-2细胞中Beclin-1 mRNA及蛋白表达明显增高(P<0.05),LncRNA XLOC_036125 siRNA组HK-2细胞中Lgmn mRNA及蛋白表达则明显低于siRNA对照组(P<0.05).结论 LncRNA XLOC_036125可通过靶向结合Lgmn调控Lgmn及下游Beclin-1表达水平,参与HK-2细胞自噬调控作用,影响CI-AKI的发生.
急性肾损伤、急性心肌梗死、长链非编码RNA、细胞自噬
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R541.4(心脏、血管(循环系)疾病)
新疆维吾尔自治区自然科学基金2019D01C005
2022-12-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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