miR-374 b-5p靶向VEGFC对肺癌细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化的影响

摘要：

目的 探讨微小RNA-374b-5p(miR-374b-5p)靶向血管内皮生长因子(VEGF)C对肺癌细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹分别检测人支气管上皮BEAS-2B细胞和肺癌A549、H1299、H358细胞中miR-374b-5p、VEGFC蛋白表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-374b-5p和VEGFC的靶向关系;将miR-374b-5p mimics(mimics组)及其阴性对照(NC组)转染至H1299细胞中,实时荧光定量PCR检测miR-374b-5p表达水平;另设mimics+pcDNA3.1组(共转染miR-374b-5p mimics和pcDNA3.1空载体质粒)和mimics+VEG-FC组(共转染miR-374b-5p mimics和pcDNA3.1-VEGFC过表达质粒),采用划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室实验检测细胞侵袭,Western印迹检测VEGFC蛋白和EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin和波形蛋白(Vimentin)表达水平.结果 与BEAS-2B细胞比较,A549、H1299、H358细胞中miR-374b-5p表达水平明显降低,而VEGFC蛋白表达水平明显升高,且H1299细胞变化最为显著(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验证实miR-374b-5p可与VEGFC靶向结合.与NC组比较,mimics组细胞中miR-374b-5p和E-cadherin蛋白表达水平明显升高,细胞迁移、侵袭能力明显减弱且细胞中VEGFC、N-cadher-in、Vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与mimics+pcDNA3.1组比较,mimics+VEGFC组细胞迁移、侵袭能力明显增强且细胞中VEGFC、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显升高,而E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论 miR-374b-5p过表达可通过靶向调控VEGFC抑制肺癌H1299细胞迁移、侵袭和EMT.

关键词：肺癌、微小RNA-374b-5p、上皮-间质转化、血管内皮生长因子C、迁移、侵袭

所属期刊栏目：42

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：河北省医学科学研究重点课题计划项目20180853

在线出版日期：2022-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：5593-5598