10.3969/j.issn.1005-9202.2022.22.049
miR-497对THP-1巨噬细胞NLRP1表达及胆固醇流出的影响
目的 探讨miR-497对人单核细胞白血病(THP)-1巨噬细胞含有Pyrin结构域NLR家族蛋白(NLRP)1表达及胆固醇流出的影响.方法 THP-1巨噬细胞,经佛波酯及氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)处理,转化为泡沫细胞.将miR-497 mimic转染入细胞内,采用油红O和Dil Ox-LDL染色检测细胞中的脂质积累和胆固醇流出情况,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测NLRP1 mRNA表达水平,Western印迹检测NLRP1、CD36、白细胞介素(IL)-1β及IL-18蛋白水平及荧光素酶报告基因分析miR-497与NLRP1的直接作用.结果 油红O染色表明,miR-497 mimic转染后24 h,细胞中脂质储存显著下降(P<0.05).利用Dil Ox-LDL来追踪Ox-LDL摄取,发现miR-497 mimic转染后24 h和48 h的胆固醇流出量显著高于对照组(P<0.05).与对照组相比,miR-497 mimic转染显著降低了THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞的NLRP1蛋白表达(P<0.05),并且CD36和IL-1β、IL-18等促炎因子蛋白表达显著降低(P<0.05).NLRP1用荧光素酶报告基因检测miR-497的靶基因,并且与对照组相比,miR-497 mimic可显著抑制NLRP1 mRNA表达(P<0.05).结论 miR-497通过靶向抑制THP-1巨噬细胞NLRP1,促进胆固醇流出.
miR-497、单核细胞白血病(THP)-1巨噬细胞、含有Pyrin结构域NLR家族蛋白(NLRP)1、胆固醇
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R363(病理学)
湖南省卫生健康委科研计划课题项目B2019108
2022-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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