10.3969/j.issn.1005-9202.2022.18.047
白藜芦醇调控miR-25对高糖诱导成骨细胞增殖和凋亡的作用机制
目的 探讨白藜芦醇调控miR-25对高糖诱导的成骨细胞增殖和凋亡的影响和机制.方法 采用25 mmol/L的葡萄糖处理MC3T3-E1,在此基础上用不同浓度的白藜芦醇(0、20、40、80μmol/L)干预体外培养的MC3T3-E1细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力,确定用药浓度.流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved-caspase)-3蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-25的表达水平.将miR-25模拟物转染MC3T3-E1细胞,经高糖刺激后,采用上述方法检测细胞增殖和凋亡的变化.将miR-25抑制物转染MC3T3-E1细胞,经高糖刺激和白藜芦醇干预后,采用上述方法检测细胞增殖和凋亡的变化.Western印迹检测核因子(NF)-κB信号通路蛋白相关蛋白表达水平.结果 高糖诱导后MC3T3-E1细胞存活率显著降低,白藜芦醇干预可显著减轻高糖刺激对MC3T3-E1细胞存活的抑制作用,并呈一定的剂量依赖性(P<0.05).高糖诱导后MC3T3-E1细胞凋亡率显著升高,Cleaved-caspase-3蛋白表达显著升高,miR-25表达显著降低,白藜芦醇(40μmol/L)干预可显著减轻高糖刺激对MC3T3-E1细胞凋亡及miR-25表达的影响(P<0.05).高表达miR-25可显著减轻高糖刺激对MC3T3-E1细胞增殖和凋亡的影响(P<0.05).低表达miR-25可逆转白藜芦醇对高糖诱导的MC3T3-E1细胞增殖和凋亡的影响(P<0.05).白藜芦醇干预可显著减轻高糖刺激对MC3T3-E1细胞NF-κB信号通路的影响,低表达miR-25可逆转白藜芦醇对高糖诱导的MC3T3-E1细胞NF-κB信号通路的影响(P<0.05).结论 白藜芦醇通过上调miR-25抑制NF-κB信号通路促进成骨细胞存活,减轻高糖诱导的成骨细胞凋亡,进而发挥保护作用.
白藜芦醇、miR-25、高糖、成骨细胞、增殖、凋亡
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R651.2(外科学各论)
2022-10-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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