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10.3969/j.issn.1005-9202.2022.17.035

miR-145-5p通过靶向PAK4促进非小细胞肺癌对吉非替尼的敏感性

引用
目的 研究miR-145-5p通过靶向p21活化激酶(PAK)4对非小细胞肺癌对吉非替尼的敏感性的作用及机制.方法 RT-qPCR检测miR-145-5p mRNA和PAK4 mRNA的表达,利用Lipofectamine2000将miR-NC(miR-NC组)、miR-145-5p mimic(miR-145-5p mimic组)、miR-145-5p inhibitor(miR-145-5p inhibitor组)、pc-PAK4质粒分别或联合转染进入A549/GR细胞,未转染的A549/GR细胞为对照组.噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞法检测细胞凋亡,双荧光素酶报告检测靶向关系,Western印迹检测PAK4蛋白相对表达水平.在裸鼠左腋下皮下注射转染过的A549/GR细胞,分为空白组、miR-145-5p mimic组、pc-PAK4组、miR-145-5p mimic+pc-PAK4组.每隔一天给每只小鼠口服吉非替尼(100 mg/kg).第24天颈椎脱位法处死裸鼠,完整取出皮下肿瘤,电子天平称重,RT-PCR检测小RNA和靶基因表达,TUNEL染色检测凋亡.结果 与正常肺细胞BEAS-2B相比,A549和A549/GR细胞中miR-145-5p明显低表达(P<0.01).与对照组相比,miR-145-5p inhibitor组A549/GR细胞活性从24 h开始明显升高,细胞凋亡率明显降低(P<0.01,P<0.05);miR-145-5p mimic组A549/GR细胞活性从36 h开始明显降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.01,P<0.05).miR-145-5p对野生型PAK4荧光素酶活性有明显下调作用(P<0.01),对突变型PAK4荧光素酶活性没有明显作用(P>0.05).共转染pc-PAK4明显逆转miR-145-5p高表达对A549/GR细胞作用(P<0.01).miR-145-5p高表达明显减小A549/GR移植瘤体积,减轻A549/GR移植瘤重量,明显上调miR-145-5p mRNA表达,明显下调PAK4 mRNA表达,明显上升细胞凋亡率;共转染pc-PAK4明显逆转miR-145-5p高表达对A549/GR移植瘤作用(P<0.01).结论 miR-145-5p通过靶向PAK4促进非小细胞肺癌对吉非替尼的敏感性.

miR-145-5p、p21活化激酶(PAK)4、非小细胞肺癌、吉非替尼

42

R734.2(肿瘤学)

陕西省社会发展科技攻关项目2016SF-323

2022-09-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

4257-4263

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1005-9202

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