羊栖菜多糖通过调控miR-29b-5p/AQP9表达对过氧化氢诱导的星形胶质细胞氧化损伤的影响及机制

摘要：

目的 探讨羊栖菜多糖(SFPS)对过氧化氢(H2O2)引起星形胶质细胞氧化损伤的影响及作用机制.方法 用200μmol/L H2 O2处理细胞24 h作为H2 O2组,以正常培养细胞作为对照(Con)组;分别用15 mg/L、30 mg/L、60 mg/L的SFPS培养液预处理24 h后用200μmol/L H2 O2诱导处理24 h,分别记为H2 O2+SFPS-L组、H2 O2+SFPS-M组、H2 O2+SFPS-H组.将miR-NC、miR-29b-5p转染至星形胶质细胞后用200μmol/L H2 O2再诱导处理24 h,记为H2 O2+miR-NC组、H2 O2+miR-29b-5p组;将anti-miR-NC、anti-miR-29b-5p转染至星形胶质细胞后用60 mg/L的SFPS培养液处理24 h后再用200μmol/L H2O2诱导处理24 h,分别记为H2O2+SFPS+anti-miR-NC组、H2O2+SFPS+anti-miR-29b-5p组.丙二醛(MDA)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测MDA含量、SOD、GSH-Px活性;Western印迹检测水通道蛋白(AQP)9水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-29b-5p和AQP9 mRNA表达水平;荧光素酶报告实验检测miR-29b-5p和AQP9的靶向关系.结果 与Con组相比,H2O2组星形胶质细胞中MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低(均P<0.05);与H2 O2组相比,不同浓度SFPS组星形胶质细胞中MDA含量逐渐降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,呈浓度依赖性(均P<0.05).与Con组相比,H2 O2组星形胶质细胞中Bcl-2表达水平显著降低,Bax、酶切caspase-3表达水平及细胞凋亡率均显著升高(均P<0.05);与H2 O2组相比,不同浓度SFPS组星形胶质细胞中Bcl-2表达水平显著升高,Bax、酶切caspase-3表达水平及细胞凋亡率均显著降低,且均呈浓度依赖性(均P<0.05),与Con组相比,H2O2组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著降低,AQP9 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05);与H2 O2组相比,不同浓度SFPS糖组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著升高,AQP9 mRNA和蛋白表达水平均显著降低,且均呈浓度依赖性(均P<0.05).miR-29b-5p组荧光素酶活性显著低于miR-NC组(P<0.05).相较于miR-NC组AQP9蛋白表达水平,miR-29b-5p组显著降低;相较于anti-miR-NC组AQP9蛋白表达水平,anti-miR-29b-5p组显著升高(均P<0.05).与H2 O2+miR-NC组相比,H2 O2+miR-29b-5p组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著升高,AQP9表达水平显著降低,MDA水平显著降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,Bcl-2水平显著升高,Bax水平和细胞凋亡率显著降低(均P<0.05),与H2 O2组相比,H2 O2+SFPS组星形胶质细胞中miR-29b-5p水平显著升高,AQP9水平显著降低,MDA水平显著降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,Bcl-2水平显著升高,Bax水平及细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与H2O2+SFPS+anti-miR-NC组相比,H2O2+SFPS+anti-miR-29b-5p组星形胶质细胞中miR-29b-5p水平显著降低,AQP9水平显著升高,MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低,Bcl-2水平显著降低,Bax水平及细胞凋亡率显著升高(均P<0.05).结论 SFPS可抑制H2O2诱导的星形胶质细胞氧化应激和凋亡,保护H2 O2引起的星形胶质细胞氧化损伤,其机制可能与miR-29b-5p和AQP9有关.

关键词：羊栖菜多糖;miR-29b-5p;AQP9;星形胶质细胞;过氧化氢;氧化损伤

所属期刊栏目：42

分类号：R741(神经病学与精神病学)

在线出版日期：2022-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：186-191