藁本内酯通过抑制DAPK1表达对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的保护作用及其机制

摘要：

目的 探讨藁本内酯(LIG)调控死亡相关蛋白激酶(DAPK)1表达对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的保护作用.方法 将肺泡上皮细胞(A549)分为对照组,感染组,感染+LIG-低组、感染+LIG-中组、感染+LIG-高组、感染+si-NC组、感染+si-DAPK1组、感染+LIG+pcDNA组、感染+LIG+pcDNA-DAPK1组.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中白细胞介素(IL)-10和IL-6水平;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测DAPK1 mRNA的表达水平;Western印迹检测DAPK1蛋白、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3的表达水平.结果 与对照组比较,感染组IL-6水平显著升高,IL-10水平显著降低(均P<0.05);与感染组比较,感染+LIG-低、中、高组IL-6水平均显著降低,IL-10水平均显著升高,且呈显著的浓度依赖性(均P<0.05).与对照组比较,感染组凋亡率显著增加,Bcl-2蛋白表达水平显著降低,Bax和酶切caspase3蛋白的表达水平显著升高(均P<0.05);与感染组比较,感染+LIG-低、中、高组细胞凋亡率显著降低,Bcl-2蛋白水平显著升高,Bax和酶切caspase3蛋白水平显著降低,且呈显著的浓度依赖性(均P<0.05).与对照组比较,感染组DAPK1 mRNA和DAPK1蛋白水平显著升高(均P<0.05);与感染组比较,感染+LIG-低、中、高组DAPK1 mRNA和DAPK1蛋白水平显著降低,且呈显著的剂量依赖性(均P<0.05).后续选取LIG 40μmol/L浓度进行实验.与对照组比较,感染组DAPK1蛋白、IL-6、Bax蛋白、酶切caspase3蛋白水平显著升高,IL-10和Bcl-2蛋白水平显著降低,细胞凋亡率显著升高(均P<0.05);与感染+si-NC组比较,感染+si-DAPK1组DAPK1蛋白、IL-6、Bax蛋白、酶切caspase3蛋白水平显著降低,IL-10和Bcl-2蛋白水平显著升高,细胞凋亡率显著降低(均P<0.05).与感染组比较,感染+LIG组DAPK1蛋白、IL-6、Bax蛋白、酶切caspase3蛋白水平显著降低,IL-10和Bcl-2蛋白水平显著升高,细胞凋亡率显著降低;与感染+LIG+pcDNA组比较,感染+LIG+pcDNA-DAPK1组DAPK1蛋白、IL-6、Bax蛋白、酶切caspase3蛋白水平显著升高,IL-10和Bcl-2蛋白水平显著降低,细胞凋亡率显著升高(均P<0.05).结论 LIG通过抑制DAPK1表达对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤有保护作用.

关键词：藁本内酯;肺泡上皮细胞;肺炎链球菌感染;死亡相关蛋白激酶(DAPK)1;细胞损伤

所属期刊栏目：41

分类号：R285;R563.1(中药学)

资助基金：武汉市临床医学科研项目资金资助WX15B21

在线出版日期：2022-01-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：5667-5671