miR-424介导的VEGFA低表达阻碍宫颈鳞状细胞癌侵袭和转移

摘要：

目的 探究miR-424介导的血管内皮生长因子(VEGF)A低表达对宫颈鳞状细胞癌的侵袭和转移的影响.方法 建立宫颈癌裸鼠抑制瘤模型,30 d后检测肿瘤体积、肿瘤重量;qPCR检测miR-424表达水平;免疫组化检测Ki67、VEG-FA阳性表达率;荧光素酶报告实验验证miR-424-5p与VEGFA靶向关系;将VEGFA构建到腺病毒LV中过表达,SiHa细胞用miR-424 mimic转染或用LV-VEGFA感染或联合处理将细胞随机分为四组:Control组、miR-424 mimic组、LV-VEGFA组和miR-424+VEGFA组进行后续实验.CCK-8法检测细胞增殖倍数;克隆形成法检测细胞克隆形成率;Transwell检测侵袭细胞数;划痕法检测细胞迁移;Western印迹检测VEGFA、Ki67、PCNA、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平;显微镜下观察Si-Ha细胞由上皮向间质转化时细胞形态的变化.结果 与Scramble组比较,miR-424 agomir组肿瘤体积、肿瘤肿瘤、Ki67阳性细胞数目和VEGF阳性细胞数目显著降低(均P<0.05);与Ect1/E6E7组相比较,SiHa组、Hela组、C33A组miR-424水平均显著降低,VEGFA水平均显著升高(均P<0.05).SiHa组变化最明显;与VEGFA Wt组比较,VEGFA Wt+miR-424-5p mimic组荧光素酶活性显著升高(P<0.05);与Control组比较,miR-424 mimic组miR-424表达水平显著升高(P<0.05),细胞增殖倍数显著下降(P<0.05),克隆形成率显著下降(P<0.05),Ki67、PCNA蛋白水平显著降低(P<0.05),侵袭细胞数显著降低(P<0.05),细胞迁移率显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),N-cadherin、Vimentin蛋白水平显著降低(P<0.05).LV-VEGFA组miR-424表达水平显著升高(P<0.05),细胞增殖倍数显著上升(P<0.05),克隆形成率显著上升(P<0.05),Ki67、PCNA蛋白水平显著升高(P<0.05),侵袭细胞数显著升高(P<0.05),细胞迁移率显著升高(P<0.05),E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05),N-cadherin、Vimentin蛋白水平显著升高(P<0.05).与LV-VEGFA组比较,miR-424+VEGFA组miR-424表达水平显著升高(P<0.05),细胞增殖倍数显著下降(P<0.05),克隆形成率显著下降(P<0.05),Ki67、PCNA蛋白水平显著降低(P<0.05),侵袭细胞数显著降低(P<0.05),细胞迁移率显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),N-cadherin、Vimentin蛋白水平显著降低(P<0.05).结论 miR-424介导的VEGFA低表达阻碍宫颈鳞状细胞癌的侵袭和转移.

关键词：宫颈癌;miR-424;血管内皮生长因子A;侵袭和转移;EMT

所属期刊栏目：41

分类号：R737.7(肿瘤学)

资助基金：江西省卫生计生委科研计划项目20197452

在线出版日期：2021-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：5256-5262