miR-27a靶向KIF3A基因调控LPS刺激牙髓细胞增殖及凋亡的分子机制

摘要：

目的 探讨微小RNA(miR)-27a靶向驱动蛋白2家族蛋白(KIF)3A调控脂多糖(LPS)诱导的牙髓细胞增殖及凋亡的分子机制.方法 体外分离培养牙髓细胞(hDPC),根据实验需求分为NC组、LPS组、LPS+anti-miR-con组、LPS+an-ti-miR-27a组、LPS+pcDNA组、LPS+pcDNA-KIF3A组、LPS+anti-miR-27a+si-con组、LPS+anti-miR-27a+si-KIF3A组.实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-27a、KIF3A表达量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测促炎因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-8水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因检测miR-27a、KIF3A之间的靶向关系;Western印迹检测KIF3A、Toll样受体(TLR)4、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3蛋白表达.结果 LPS刺激可提高细胞凋亡率(P<0.05),降低细胞存活率(P<0.05),降低Cy-clinD1表达水平(P<0.05),而增加酶切Caspase-3、TLR4、TNF-α、IL-6、IL-8表达水平(P<0.05);干扰miR-27a的表达或KIF3A过表达可降低酶切Caspase-3、TLR4、TNF-α、IL-6、IL-8表达水平(P<0.05),提高细胞存活率(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.05);双荧光素酶报告实验结果证实miR-27a与KIF3A存在靶向关系,miR-27a可负性调控KIF3A的表达;干扰KIF3A的表达可逆转转染anti-miR-27a对LPS刺激hDPC存活、细胞凋亡及炎症因子分泌的作用.结论 干扰miR-27a的表达可通过上调KIF3A的表达抑制LPS诱导的hDPC凋亡,促进细胞存活,其作用机制可能与降低LPS诱导的hDPC炎症反应有关.

关键词：miR-27a;KIF3A;LPS;牙髓;增殖;凋亡

所属期刊栏目：41

分类号：R781.31(口腔科学)

在线出版日期：2021-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：4377-4382