miR-491-5p靶向CCL22对舌鳞状细胞癌细胞增殖及凋亡的影响

摘要：

目的 研究miR-491-5p对舌鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及机制.方法 RT-qPCR检测人正常口腔角质细胞培养NHOK、人舌癌细胞TCA8113、UM1、SCC1中miR-491-5p、趋化因子配体(CCL)22的表达;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-491-5p组(转染miR-491-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-491-5p组(转染anti-miR-491-5p)、si-NC组(转染si-NC)、si-CCL22组(转染si-CCL22)、miR-491-5p+pc DNA组(共转染miR-491-5p mimics和pc DNA)、miR-491-5p+pc DNA-CCL22组(共转染miR-491-5p mimics和pc DNA-CCL22),用脂质体法转染至TCA8113细胞;Western印迹检测细胞中CCL22的蛋白表达;噻唑蓝(MTT)、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡;双荧光素酶报告实验检测细胞中miR-491-5p与CCL22的结合力;裸鼠成瘤实验检测肿瘤的生长.结果 与NHOK组相比,TCA8113组、UM1组、SCC1组舌鳞状细胞癌细胞中miR-491-5p mRNA表达明显降低,CCL22 mRNA表达和蛋白表达均明显升高(P<0.05).其中TCA8113细胞的变化最大,故选用该细胞用于后续研究.与miR-NC组相比,miR-491-5p组TCA8113细胞miR-491-5p mRNA表达显著升高,在48、72 h时,细胞增殖显著降低,细胞凋亡率显著升高(均P<0.05).miR-491-5p的5'UTR端存在7个与CCL22的3'UTR端互补的核苷酸序列.与miR-NC组相比,miR-491-5p组WT-CCL22细胞的荧光素酶活性明显降低(P<0.05).与anti-miR-NC组CCL22蛋白(0.99±0.04)相比,anti-miR-491-5p组(2.01±0.14)显著升高,与miR-NC组CCL22蛋白(1.00±0.66)相比,miR-491-5p组(0.38±0.01)显著降低(P<0.05).与si-NC组相比,si-CCL22组TCA8113细胞CCL22蛋白表达明显降低,在48、72 h时,细胞增殖明显降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.05).与si-NC组相比,si-CCL22组肿瘤组织CCL22蛋白表达明显降低,肿瘤质量和体积也均明显降低(P<0.05).与miR-491-5p+pc DNA组相比,miR-491-5p+pc DNA-CCL22组TCA8113细胞中miR-491-5p mRNA表达明显降低,在48、72 h时,细胞增殖明显升高,细胞凋亡率明显降低(P<0.05).结论 miR-491-5p可调控舌鳞状细胞癌细胞的增殖和凋亡.

关键词：miR-491-5p;趋化因子配体(CCL)22;舌鳞状细胞癌;增殖;凋亡

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分类号：R739.86(肿瘤学)

资助基金：武汉市卫生和计划生育委员会科研项目WX17Q02

在线出版日期：2021-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：4354-4358