双标细胞因子诱导的杀伤性细胞系构建

摘要：

目的 构建表达荧光素酶(Luc)及绿色荧光蛋白(GFP)双标细胞因子诱导的杀伤性(CIK)细胞系.方法 体外原代培养C57BL/6小鼠CIK细胞,使用构建好的表达Luc及GFP的慢病毒载体包装重组慢病毒,感染培养第14天的CIK细胞,嘌呤霉素筛选2 w后,采用荧光倒置显微镜观察GFP表达情况,PCR、基因测序及体外活体成像系统对感染后的CIK细胞表达Luc进行验证.结果 Luc-GFP-CIK双标细胞系构建成功,能够稳定表达Luc及GFP.荧光倒置显微镜观察显示转染后CIK细胞形态正常且表达GFP;PCR和测序结果 显示转染后CIK细胞获得Luc基因;体外活体成像系统检测显示转染后CIK细胞表达Luc.结论 初步构建了简便、安全的双标CIK细胞系,该方法便于普及,可为CIK细胞在体内的进一步研究提供前期基础和实验工具.

关键词：细胞因子诱导的杀伤细胞、荧光素酶、绿色荧光蛋白、慢病毒、生物发光

所属期刊栏目：39

分类号：R392.12

资助基金：海口市人民医院院内课题项目2014-YQY-04,2015-YNJ-05-038

在线出版日期：2019-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：4058-4062