10.3969/j.issn.1005-9202.2018.04.052
组织化胰腺的体外构建及其在细胞移植中的作用
目的 探讨组织工程化胰腺的体外构建及其在细胞移植中的作用.方法 取SD大鼠8只,采用旋转壁式生物反应器,建立微重力环境下共培养SD大鼠胰岛和睾丸支持细胞,建立糖尿病SD大鼠模型,进行胰岛移植.移植后,检测各组大鼠血糖水平,摘取30 d以上保持血糖正常水平的大鼠肾脏组织,清洗后固定,包埋、切片,进行苏木素-伊红(HE)染色,显微下观察,并进行Fas-L、胰岛素免疫组化学法染色,对大鼠移植物进行鉴定并检测葡萄糖糖耐量.结果 分离纯化的睾丸支持细胞贴壁后于培养箱中继续培养24 h,细胞基本已全部贴壁生长,细胞立体感较强,显微镜下可见极少量球形精细胞贴附于睾丸细胞上,经台盼蓝染色后活细胞透亮,总数占95%以上.HE染色可见细胞形态呈宽大柱状或纤维样,排列紧密,多个一起存在时融合成片,界限不清,呈单层膜状,一般有3~4个突起,突起相互连接,胞质铺展较大,可见多量大小不一的空泡状结构.培养24 h后,睾丸支持细胞-胰岛球形细胞复合物逐步形成,复合物呈球形,被支持细胞包裹;Fas-L免疫组织切片染色可见支持细胞呈阳性,与胰岛素阳性的β细胞检测结果与透射电镜观察结果一致,共培养的胰岛生长状态相对较好.从血糖水平结果总结,微重力环境下共培养睾丸支持细胞-胰岛细胞复合物能够提高胰岛活性,降低其免疫原性;与接受新鲜胰岛移植的SD大鼠相比,复合物移植使模型大鼠保持血糖正常时间明显更久.结论 移植睾丸支持细胞-胰岛细胞复合物的模型大鼠体内胰岛对葡萄糖保持明显的敏感性,复合物移植组大鼠平均血糖基本在2h内可以恢复正常,与正常检测结果接近.
组织化胰腺、细胞移植
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R587(内分泌腺疾病及代谢病)
国家自然科学基金项目U1304810;2012年河南省科技厅重点攻关项目122102310460
2018-03-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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