重组腺病毒p21转染人毛乳头细胞的模型构建

摘要：

目的 确定重组腺病毒p21(rAd5-CDKN1A-1p2 shRNA)在人毛乳头细胞(HDPCs)转染中的转染效率及最佳滴度.方法 采用携带绿色荧光蛋白(GFP)分子的重组腺病毒rAd5-CDKN1A-1p2 shRNA确定DPCs对腺病毒的敏感性;以不同感染系数(MOI)值稀释rAd5-CDKN1A转染DPCs并通过荧光显微镜及3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色检测每组细胞的转染效率及增殖效率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法证实rAd5-CDKN1A转入DPCs后p21基因沉默目的达到.结果rAd5-CDKN1A转染DPCs在MOI为100~500的转染效率均大于95%,当MOI为100、200和500时,各组转染效率升高不明显且差异无统计学意义(P>0.05);MOI=200及MOI=500组对DPCs细胞的增殖抑制效果明显(P<0.05);而MOI=100组对DPCs细胞增殖促进效果显著(P<0.05),MOI=25和MOI=50组对DPCs细胞增殖无明显作用;rAd5-CDKN1A转染后的DPCs较正常DPCs中p21基因的mRNA表达明显减弱.结论 成功构建重组腺病毒转染DPCs的模型,并确立了最佳转染滴度:MOI=100,获得较高且稳定的转染效率.

关键词：毛乳头、转染、腺病毒

所属期刊栏目：38

分类号：R751(皮肤病学与性病学)

资助基金：河北省自然科学基金H2013206465;河北省高层次人才资助项目C2015005005

在线出版日期：2018-03-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：884-887