10.3969/j.issn.1005-9202.2017.19.016
S6K1沉默对宫颈癌细胞侵袭迁移及相关基因表达的影响
目的 探讨RNA干扰核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)对人宫颈癌细胞Hela侵袭迁移及相关基因表达的影响.方法 根据文献报道及siRNA设计原则合成靶向S6K1基因的siRNA,以阳离子脂质体Lipofectamine 2000为载体转染对数生长期Hela细胞(沉默组),同时设转染不针对任何基因随机序列的阴性对照组和转染试剂的空白对照组.转染48 h后采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测干扰效率,分别于转染24、48、72 h后采用WST法评价靶向沉默S6K1对Hela细胞增殖的影响,采用Transwell小室法检测经S6K1沉默后对Hela细胞侵袭迁移的影响,采用West-ern印迹法检测S6K1沉默后Hela细胞中人基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMPO和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1、TIMP-2的蛋白水平.结果 以空白对照组为参照(其S6K1 mRNA水平为1.000),阴性对照组的S6K1 mRNA水平为(1.027±0.034),差异无统计学意义(P>0.05),而沉默组的S6K1 mRNA水平(0.158±0.012)低于其余两组(P<0.05),相对于空白对照组的沉默率为(92.4±3.7)%.与空白对照组和阴性对照组比较,沉默组转染后的增殖率降低,迁移实验和侵袭实验中的穿膜细胞数均降低,MMP-2、MMPO蛋白水平均降低,而TIMP-1、TIMp-2蛋白水平均升高(P<0.05).结论 RNA靶向沉默S6K1表达可抑制人宫颈癌Hela细胞侵袭迁移,可能与其抑制MMP-2/9表达及促进TIMP-1/2表达有关.
核糖体蛋白S6激酶1、宫颈癌、侵袭、迁移
37
R739(肿瘤学)
国家自然科学基金81302304
2017-11-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
4726-4728