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10.3969/j.issn.1005-9202.2017.13.022

抗Aβ42单链抗体对阿尔茨海默病小鼠脑中淀粉样沉积的改善作用

引用
目的 探讨以β淀粉样蛋白(Aβ)42为靶抗原筛选人源天然单链抗体(scFv)噬菌体抗体库中的特异性抗体对阿尔茨海默病(AD)模型鼠中淀粉样沉积的影响.方法 以Aβ42抗原包被免疫管,对人源天然scFv噬菌体抗体库进行筛选,经过3轮吸附-洗脱-扩增淘选富集,制备单克隆噬菌体抗体颗粒,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测scFv的结合活性,得到一株阳性克隆scFv23.采用Western印迹和免疫组化的方法检测了scFv23与Aβ42单体、寡聚体、纤维和鼠脑中Aβ沉积的结合能力.并通过甲氮甲唑蓝(MTT)法检测scFv23对Aβ42寡聚体引起细胞毒性的影响,同时采用硫黄素-T荧光法(ThT-F)测定scFv23对Aβ42聚集形成纤维的影响.最后,通过体内实验检测了scFv23对AD鼠模型脑中Aβ42沉积的影响.结果 通过对人源天然scFv噬菌体抗体库进行筛选得到一株与Aβ42具有高亲和力的克隆scFv23.实验发现scFv23可以特异性识别Aβ42寡聚体,纤维聚集体和鼠脑中Aβ42沉积,但是不能与Aβ42单体特异性结合.根据体外实验结果,scFv23可以有效抑制Aβ42寡聚体所诱导的细胞死亡,并且scFv23可以抑制Aβ42纤维聚集体的形成.体内实验结果发现,scFv23可以有效清除AD鼠模型中Aβ42沉积.结论 通过噬菌体文库筛选得到的scFv23能够特异性识别脑组织中的淀粉样沉积,并且有效抑制转基因鼠中淀粉样沉积的形成.体外实验表明scFv23可以有效抑制Aβ42寡聚体所诱导的细胞毒性.特异性识别Aβ42的scFv可能会成为治疗AD的一种有效策略.

阿尔茨海默病、β淀粉样蛋白、单链抗体、免疫治疗

37

R745.1(神经病学与精神病学)

2017-07-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

3173-3177

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1005-9202

22-1241/R

37

2017,37(13)

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