siRNA靶向沉默YAP1对卵巢癌细胞skov3增殖凋亡的影响

摘要：

目的 探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默Yes相关蛋白(YAP)1基因表达对人卵巢癌细胞skov3增殖凋亡的影响.方法 采用脂质体LipofectamineTM 2000将靶向干扰YAP1的siRNA转染至对数生长期skov3细胞(siYAP1组),同时设不行转染处理的对照组和转染随机序列siRNA的转染对照组(siControl组),转染48 h后采用实时定量PCR(qPCR)检测各组的YAP1 mRNA水平;采用水溶性四氮唑(WST-1)法评价各组转染后的增殖情况,分别采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术及qPCR检测转染后凋亡率及凋亡相关蛋白(抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1和促凋亡蛋白Bid、Bax)的mRNA水平,PI单染流式细胞术检测转染后的细胞周期分布情况.结果 qPCR法检测发现siYAP1组转染48 h后的YAP1 mRNA水平为(0.141±0.018),低于对照组和siControl组(均P<0.05),提示在skov3细胞中靶向沉默YAP1成功;skov3细胞经siRNA靶向沉默YAP1表达后的生长增殖受明显抑制、凋亡形态明显改变及发生G0/G1期细胞周期阻滞,与对照组和siControl组相比,siYAP1组的增殖抑制率、凋亡率、促凋亡蛋白水平及G0/G1期细胞比例均升高,而促凋亡蛋白水平及S期细胞比例均降低(P<0.05);对照组和siControl组增殖、凋亡及细胞周期相关指标的差异无统计学意义(P>0.05).结论 通过siRNA在基因水平上沉默YAP1表达可抑制skov3细胞的增殖并诱发凋亡和细胞周期阻滞,在卵巢癌的靶向治疗中可能有一定前景.

关键词：Yes相关蛋白1、卵巢癌、增殖、凋亡

所属期刊栏目：37

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金青年基金30900659;广东省医学科学技术研究基金B2009151

在线出版日期：2017-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：797-799