10.3969/j.issn.1005-9202.2017.03.005
黄芪甲苷对早期骨关节炎软骨细胞基质金属蛋白酶-1表达的影响
目的:探讨黄芪甲苷作用于早期骨关节炎退变软骨细胞后基质金属蛋白酶( MMP)-1表达的变化。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法( MTT)检测不同浓度黄芪甲苷作用不同时间关节炎退变软骨细胞的存活率;qRT-PCR 法检测黄芪甲苷不同浓度不同作用时间处理关节炎退变软骨细胞后MMP-1基因表达情况;酶联免疫吸附( ELISA)法检测黄芪甲苷处理关节炎退变软骨细胞后细胞上清液中 MMP-1的表达;Western印迹检测黄芪甲苷处理后MMP-1蛋白表达。结果黄芪甲苷处理后关节炎软骨细胞存活率提高,20~100 mmol/L 浓度内呈剂量依赖,黄芪甲苷用量100 mmol/L效果最佳;随着培养时间的延长,细胞的存活率增加,在12 h~3 d内,第3天达到存活率最高。与对照组未经黄芪甲苷处理的软骨细胞相比,黄芪甲苷处理后的细胞中MMP-1基因表达量下降,黄芪甲苷浓度20~60 mmol/L,培养2 d内,MMP-1基因的表达量与黄芪甲苷的作用浓度与作用时间呈负相关;100 mmol/L时,第2天时MMP-1基因表达量最低。 ELISA结果显示正常软骨组织中MMP-1少量表达,关节炎软骨组织中MMP-1的浓度为正常组织中的2倍,处理后正常软骨组织中 MMP-1浓度并未发生变化,黄芪甲苷处理后的关节炎软骨组织中MMP-1浓度降低为处理前的0.5倍,但仍高于正常软骨组织中MMP-1的浓度。 Western印迹检测结果显示正常软骨组织中MMP-1蛋白少量表达,关节炎软骨组织中MMP-1蛋白大量表达,与对照组相比,黄芪甲苷处理后软骨组织中MMP-1蛋白表达量降低,但仍高于正常骨组织。结果黄芪甲苷抑制早期骨关节炎退变软骨细胞与MMP-1表达下降相关。
黄芪甲苷、关节炎、退变软骨细胞、基质金属蛋白酶-1
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R394.2
国家自然科学基金81473800
2017-03-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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