氨基端前B型钠尿肽单克隆抗体的制备及其鉴定

摘要：

目的：通过经典单克隆抗体制备技术制备氨基端前B型钠尿肽（ NT-proBNP）单克隆抗体，将单克隆抗体进行特异性和亲和力鉴定，并用于免疫学检测试剂盒的开发。方法用带His-Trx-标签蛋白的NT-proBNP免疫Balb／C小鼠制备单克隆抗体。使用PEG1500化学融合法将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2／0进行融合。用不带标签的NT-proBNP对获取的杂交瘤细胞进行反复多次克隆筛选，将稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株经腹腔注射Balb／C小鼠诱导产生腹水，经蛋白G亲和纯化后获得NT-proBNP单克隆抗体并对其进行亲和力和特异性进行鉴定。结果成功进行细胞融合并获得4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，抗体分泌亚型为IgG1，可特异性识别 NT-proBNP。经腹腔体内诱生法和蛋白 G 亲和纯化，获得高质量NT-proBNP单克隆抗体，经ELISA检测抗体效价在1∶105以上。结论通过传统经典单克隆抗体制备技术成功制备 NT-proBNP单克隆抗体，为NT-proBNP检测试剂盒的研发奠定了基础。

关键词：氨基端前B型钠尿肽、单克隆抗体、亲和纯化、心力衰竭

所属期刊栏目：37

分类号：R541.6(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金项目31270984

在线出版日期：2017-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：525-528