NM23 B对大鼠肝细胞体外增殖的影响

摘要：

目的：观察NM23B在体外培养大鼠肝细胞增殖中的作用。方法构建NM23B 过表达载体和干扰载体及其阴性对照载体，分别转染SD大鼠BRL-3A肝细胞，并设空白对照组（CON）、干扰 NC 组（siRNA-NC）、干扰组（siRNA）、过表达组（OE）、过表达 NC 组（OE-NC），通过定量PCR分析各组细胞中Cyclin D1、NM23B和PCNA的mRNA变化；Western印迹分析比较各组细胞中Cyclin D1、NM23B和PCNA蛋白的变化；流式细胞仪检测各组细胞周期比例；用CCK 8法检测细胞增殖。结果 OE组 Cyclin D1、NM23 B和 PCNA的 mRNA及蛋白的表达量较 CON 组显著增多（ P＜0.05）；另一方面，siRNA组的Cyclin D1、NM23B和PCNA的mRNA及蛋白的表达量较CON组显著降低（P＜0.05），干扰NC组和OE-NC组与CON组相比无统计学差异（P＞0.05）。 OE组的G0／G1期细胞比例明显低于CON组（P＜0.05），siRNA组的G0／G1期细胞比例明显高于 CON组（P＜0.05）。同时，OE组的S期细胞比例明显高于CON组（P＜0.05），siRNA组的S期细胞比例明显低于CON组（P＜0.05），siRNA-NC组和 OE-NC 组与CON组相比无统计学差异（P＞0.05）。 CCK-8检测细胞增殖表明OE组的增殖速度明显快于 CON组（P＜0.05），siRNA组的增殖速度明显慢于CON组（P＜0.05），siRNA-NC组和OE-NC组与CON组相比无统计学差异（P＞0.05）。结论过表达 NM23B可以加强 Cyclin D1、PCNA的表达，缩短细胞周期，从而促进肝细胞增殖；干扰NM23B表达则削弱了Cyclin D1、PCNA的表达，延长细胞周期，从而抑制肝细胞增殖。证实了 NM23B在体外培养 SD大鼠肝细胞增殖中的作用，为后续体内实验奠定了理论基础。

关键词：NM23B、大鼠BRL-3A肝细胞、细胞周期、增殖

分类号：R575(消化系及腹部疾病)

资助基金：云南省应用基础研究计划-昆明医科大学联合专项重点项目2012FB010

在线出版日期：2016-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：23-25