慢病毒介导的CDK2-shRNA促进黑色素瘤细胞A375凋亡

摘要：

目的 探讨慢病毒介导的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)2-shRNA对人黑色素瘤细胞A375凋亡的影响.方法 依据CDK2基因序列,设计3条靶向干扰CDK2的序列,构建CDK2-shRNA慢病毒载体,质粒转染人胚肾细胞株(HEK293)细胞进行慢病毒包装,滴度测定包装的重组pGMLV-CDK2-shRNA慢病毒,免疫印迹检测对CDK2的干扰效率及对细胞周期蛋白(cyclin)E、E2F1、RB蛋白表达的影响,四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)检测细胞增殖活力,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测A375凋亡的发生.结果 成功获得包装的重组pGMLV-CDK2-shRNA慢病毒,病毒滴度为5×108TU/ml.重组的pGMLV-CDK2-shRNA慢病毒能有效下调CDK2、cyclinE、E2F1蛋白表达,抑制A375细胞增殖和触发凋亡.结论 基于慢病毒介导的CDK2-shRNA能够促进黑色素瘤细胞A375凋亡发生,为黑色素瘤的基因治疗提供理论支撑.

关键词：黑色素瘤、细胞周期蛋白依赖性激酶、慢病毒载体、凋亡

所属期刊栏目：35

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：厦门市卫生局资助项目3502Z20130190;厦门市同安区科技局资助项目20120081

在线出版日期：2015-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：6345-6347,6473