腺病毒介导的KDR－HSV－tk系统对血管内皮细胞的杀伤作用及旁观者效应

摘要：

目的：研究腺病毒介导的KDR－HSV－tk系统对血管内皮细胞的杀伤作用及旁杀效应。方法体外构建受 KDR启动子和巨细胞病毒（ CMV）启动子调控并可表达HSV－tk基因的AdKDR－HSV－tk和AdCMV－HSV－tk，经293细胞包装、扩增后，分别感染表达KDR的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）和不表达KDR的人鼻咽癌细胞CNE－2，建立HUVEC／tk及CNE－2／tk，观察丙氧鸟苷（GCV）处理后 HUVEC 杀伤率及旁观者效应。结果受感染的HUVEC和CNE－2细胞中均有绿色荧光蛋白的表达。在感染复数（ MOI）为100的条件下，GCV浓度由0增至50 mg／L 时含 AdKDR－HSV－tk的HUVEC和CNE－2细胞存活率从100％分别降至（23．1±3．9）％和（69．8±3．1）％（P＜0．01）；感染AdCMV－HSV－tk的HUVEC和 CNE－2细胞存活率从100％分别降至（13．9±2．9）％和（15．7±5．2）％（P＜0．05）；HUVEC／tk细胞对GCV的敏感性明显高于亲代HUVEC细胞， HUVEC＋HUVEC／tk混合细胞的生存率随HUVEC／tk比例的增加而下降，说明AdKDR－HSV－tk／GCV系统不但能杀伤转染tk基因的HUVEC，也能杀伤未导入转染tk基因的HUVEC细胞，存在明显的旁观者效应。结论腺病毒介导的KDR－HSV－tk／GCV系统对血管内皮细胞具有特异的杀伤作用及旁观者效应，为抗肿瘤血管靶向治疗奠定了基础。

关键词：KDR启动子、旁观者效应、HSV-tk、血管内皮细胞

分类号：R739.63(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81350022

在线出版日期：2015-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：4131-4133