基于p38 MAPK通路探讨疏肝健脾方药含药血清对LPS刺激下大鼠Kupffer细胞炎症损伤保护作用的机制

摘要：

目的：基于p38MAPK通路探讨疏肝健脾方药含药血清对脂多糖（LPS）刺激大鼠Kupffer细胞炎症损伤的保护作用。方法体外培养并鉴定SD大鼠Kupffer细胞，提取并制备疏肝健脾方药含药血清，在LPS刺激大鼠Kupffer细胞产生炎症反应基础上，对Kupffer细胞进行疏肝健脾方药含药血清、p38MAPK抑制剂药物干预，ELISA法检测Kupffer细胞上清液中白介素（IL）－6、肿瘤坏死因子（TNF）－α含量的表达，Western印迹检测Kupffer细胞 TLR4、p38MAPK、p－p38MAPK蛋白的表达。结果疏肝健脾方药含药血清提取量约为每只2～3 ml，大鼠获得纯化并经免疫荧光法鉴定Kupffer细胞（0．5～1．0）×107个，Typan blue染色测定细胞活力均在95％以上；LPS组较空白血清组IL－6、TNF－α水平均有显著升高（P＜0．01）；与LPS组比较，各药物干预组IL－6、TNF－α表达水平显著降低（P＜0．01）；与空白血清组比较，LPS组的p38MAPK、p－p38MAPK、TLR4蛋白表达均有显著升高（P＜0．01）；与LPS组比较，SB239063能显著下调p38MAPK的蛋白表达水平（P＜0．01），肝健脾组亦有下调，但无显著差异（P＞0．05）；疏肝健脾组、SB239063组的p－p38MAPK蛋白表达水平均下调显著（P＜0．01）；TLR4蛋白表达水平以疏肝健脾组下调具有显著性差异（P＜0．01），SB239063组下调无显著差异（ P＞0．05）。结论疏肝健脾方药可能对LPS刺激大鼠Kupffer细胞炎症损伤发挥保护作用，而含药血清可能是其重要作用途径之一。

关键词：疏肝健脾方药、p38MAPK、Kupffer细胞、炎症损伤

分类号：R28(中药学)

资助基金：国家自然科学基金项目30973694

在线出版日期：2015-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2901-2904