10.3969/j.issn.1005-9202.2014.20.083
SATB1基因对小细胞肺癌增殖、侵袭及凋亡的影响
目的:构建SATB1的siRNA表达载体,并研究其对小细胞肺癌( SCLC)的作用。方法根据SATB1的DNA序列设计3对siRNA引物,构建携带绿色荧光的重组质粒 SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2、SATB1-siRNA-N。应用 lipofect2000将载体 SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2、SATB1-siRNA-N转染入SCLC细胞NCI-H446中。转染48 h后应用Western印迹法检测转染后 SATB1蛋白表达细胞增殖能力检测( MTT法)、Tran-swell小室、流式细胞仪检测NCI-H446细胞在转染前后的增殖能力、侵袭能力、凋亡的改变。结果成功的构建了 SATB1基因的 siRNA 表达载体。转染SATB1-siRNA后的SCLC细胞内可见绿色荧光。转染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2的NCI-H446细胞中其SATB1表达明显低于转染SATB1-siRNA-N及空白对照组的NCI-H446细胞中。 MTT实验提示,转染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2的SCLC细胞与转染 SATB1-siRNA-N的同类细胞相比增殖能力受到明显抑制。 Transwell结果显示转染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2后的SCLC细胞穿膜细胞数较未转染的和转染SATB1-siRNA-N组细胞明显减少。流式结果显示细胞凋亡率转染SATB1-siRNA-1和SATB1-siRNA-2的细胞均显著高于转染 SATB1-siRNA -N和空白对照组细胞(P<0.05)。结论 SATB1-siRNA可抑制SCLC细胞的增殖及侵袭能力,并诱导其细胞凋亡,提示SATB1在人SCLC的转移中起着重要的作用。
SATB1、小细胞肺癌、siRNA、细胞凋亡
R732(肿瘤学)
辽宁医学院博士启动基金Y2011B04;辽宁省科技厅自然科学基金201202143
2014-11-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
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