10.3969/j.issn.1005-9202.2014.19.090
survivin-siRNA重组腺病毒质粒与结直肠癌细胞剂量和时间的相关性
目的:构建survivin-siRNA重组腺病毒质粒,探讨不同浓度和时间点的 survivin-siRNA 重组腺病毒质粒 pBAsi-survivin对结直肠癌SW480细胞的影响。方法将制备好的survivin-siRNA重组腺病毒载体pBAsi-survivin,按浓度梯度分别为50、100、150、200、250、300 nmol/L 6个浓度梯度分别转染SW480,并检测最适浓度下转染12、24、36、48、60、72 h 6个时间梯度,用RT-PCR检测各组细胞中survivin mRNA 的表达水平,用 West-ern印迹检测各组细胞中survivin 蛋白的表达水平,用MTT法检测细胞的生长情况。结果结直肠癌SW480细胞对survivin-siRNA重组腺病毒 pBA-si-survivin有浓度依赖性,浓度在100 nmol/L时survivin mRNA表达抑制率39.01%,蛋白表达抑制率为47.83%,细胞生长抑制率为(15.1±1.0)%;在转染48 h后转染效率最高, survivin mRNA 和蛋白表达抑制率分别为67.19%、68.24%,细胞生长抑制率为(37.0±2.7)%。结论结直肠癌SW480细胞对survivin-siRNA重组腺病毒pBAsi-survivin有浓度和时间依赖性,pBAsi-survivin浓度100 nmol/L是体外抑制结直肠癌 SW480细胞的最适宜浓度,转染48 h效率最高。
SW480、survivin、siRNA
R39
河北大学医学学科建设项目2012B2013
2014-10-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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