RNAi沉默VEGF-C对A549细胞VEGF家族因子及其受体和下游信号通路的影响

摘要：

目的：研究沉默血管内皮生长因子（ VEGF）-C对人非小细胞肺癌（ NSCLC） A549细胞 VEGF家族因子及其受体和下游信号通路的影响。方法构建靶向VEGF-C基因的重组慢病毒Lv-siRNA-VEGF-C，将其感染A549细胞，建立 VEGF-C基因低表达的 A549细胞。 ELISA法检测肿瘤细胞VEGF-C蛋白的分泌，Western印迹检测 Lv-siRNA-VEGF-C 细胞组、空载体 Lv-Con 对照组及空白 A549细胞中 VEGF 家族因子 VEGF-C、VEGF-A、VEGFR-2和VEGFR-3蛋白的表达，及下游 ERK、AKT和 p38信号通路的磷酸化活性。结果成功构建靶 VEGF-C 基因的干扰表达载体PSIH1-VEGF-C-siRNA，包装形成重组慢病毒 Lv-siRNA-VEGF-C，以慢病毒转染 A549建立 VEGF-C基因低表达细胞。与对照组相比，VEGF-C低表达组细胞中VEGF-C蛋白的表达和分泌显著降低，VEGF-A、VEGFR-2和VEGFR-3的表达也显著降低。同时，VEGFR-2和 VEGFR-3的磷酸化水平显著降低，并且VEGFR-2和VEGFR-3介导的下游信号分子ERK、AKT和p38的磷酸化水平亦明显降低（P＜0.01）。结论慢病毒介导的VEGF-C基因沉默能抑制人非小细胞肺癌A549细胞VEGF家族因子VEGF-C、VEGF-A、VEGFR-2和VEGFR-3蛋白的表达及下游ERK、AKT和 p38信号通路的磷酸化活性。

关键词：非小细胞肺癌、VEGF-C、A549 细胞、增殖、侵袭

分类号：R730.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81372293；黑龙江省普通高校新世纪优秀人才支持计划

在线出版日期：2014-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：4564-4566