溶酶体酶抑制剂对神经细胞内Nicastrin表达水平的影响

摘要：

目的 探讨溶酶体酶抑制剂对阿尔茨海默病(AD)相关蛋白Nicastrin(NCT)表达的影响,以期明确NCT的蛋白降解是否与溶酶体途径有关.方法 在用人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y建立稳定表达NCT细胞株的基础上,应用溶酶体酶抑制剂处理NCT细胞株,并结合Western印迹、亚细胞器的分级分离、免疫荧光双标等技术,检测溶酶体酶抑制剂处理后神经细胞内NCT的表达变化.结果 亚细胞器分级分离实验显示,正常情况下神经细胞内的NCT主要分布于内质网和高尔基复合体,少量NCT分布于溶酶体.Western印迹结果显示,溶酶体酶抑制剂处理后,神经细胞内源性和外源性成熟NCT(mNCT)的表达显著增强,且溶酶体酶抑制剂氯喹对mNCT蛋白表达的增强效应呈剂量依赖性和时间依赖性,但溶酶体抑制剂对非成熟NCT(imNCT)的表达无影响；免疫荧光双标结果显示,溶酶体酶抑制剂处理后,细胞内NCT的表达增强,且增多的NCT主要聚集在溶酶体内.结论 神经细胞内mNCT的降解与溶酶体途径有关.

关键词：溶酶体酶抑制剂、Nicastrin、神经细胞、蛋白降解

所属期刊栏目：32

分类号：R749.1(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30700885;教育部重点项目资助计划209102;重庆市首届优秀人才资助计划渝教人[2009]2号;重庆市教委资助计划KJ090328

在线出版日期：2012-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2975-2978