钙网织蛋白重组腺病毒载体构建及体外表达

摘要：

目的 构建钙网织蛋白(CRT)基因重组腺病毒载体,并检测其在293LP细胞中的表达.方法 根据Genbank中提供的CRT基因序列,设计并合成引物,以人乳腺癌组织cDNA文库为模板采用RT-PGR技术扩增人CRT基因片段,测序后将GRT基因片段定向克隆至pShuttle-CMV重组穿梭载体,进而将穿梭载体克隆至Pac Ⅰ限制性内切酶线性化的腺病毒载体pAdxsi.结果 重组穿梭载体pShuttle-CRT经EcoRI/Kpn Ⅰ酶切鉴定连接成功.酶切穿梭载体将CRT片段克隆至腺病毒载体pAdxsi得到Ad-CRT,鉴定证实Ad-CRT载体构建成功.Ad-CRT转染293LP细胞并通过Western印迹法和Real-time PCR法证实其体外表达.结论 成功构建CRT重组腺病毒载体Ad-CRT并证实其在293LP细胞中表达.

关键词：钙网织蛋白(CRT)、腺病毒载体、基因治疗

所属期刊栏目：32

分类号：R73(肿瘤学)

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2561-2563