骨髓间充质干细胞对兔肝脏缺血再灌注损伤定向促修复作用

摘要：

目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对家兔肝脏缺血再灌注损伤的修复作用及其机制.方法 ①取健康4周龄新西兰大白兔1只,取其BMSCs悬液,并培养扩增至第三代,部分细胞用流式细胞仪分析BMSCs表面CD29、CD44、CD45抗原的表达,余细胞用于移植.②取健康8～12周龄新西兰大白兔32只随机分为缺血再灌注组、缺血再灌注加BMSCs悬液组、缺血再灌注预处理组、假手术组.缺血再灌注组经兔上腹部正中切口,暴露肝门,用无损伤动脉夹钳闭肝门,完全阻断肝血流30 min后除去动脉夹实施再灌注,再灌注30 min.BMSCs组缺血再灌注后颈内静脉缓缓注入1×106/ml BMSC悬液0.5ml,余同缺血再灌注组.再灌注预处理组,阻断肝门使肝脏缺血5min,然后开放血流5min,反复3次,余同缺血再灌注组.假手术组只手术而不用动脉夹钳闭肝门.手术完毕,关腹,饲养1w后处死,颈内静脉取血3～4ml,放置10 min,3 000 r/min离心取上清液,置于-20℃冰箱待检.取肝组织.将修整好的肝组织小块固定包埋切片,制备防脱切片,TUNEL法检测肝细胞凋亡情况.结果 ①分离培养的BMSCs增殖旺盛,纯度较高,且均质性和稳定性好.②缺血再灌注、BMSCs、再灌注预处理组血清AST、LDH及AI较假手术组高,且肝脏组织SOD水平较缺血再灌注组低,肝脏组织病理学损害重于假手术组；BMSC、再灌注预处理组血清AST、LDH及凋亡指数(AI)较缺血再灌注组低,BMSCs组最低,且肝脏组织SOD水平较缺血再灌注组高,BMSCs组最高,肝组织病理学损害明显轻于缺血再灌注组,BMSCs组最轻,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 经颈静脉BMSCs移植,对新西兰大白兔肝脏缺血再灌注损伤有修复作用,且作用优于预处理.

关键词：骨髓间充质干细胞、肝缺血-再灌注、修复、流式细胞术

所属期刊栏目：32

分类号：R-33(医学研究方法)

在线出版日期：2012-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1202-1205