融合蛋白pTAT-XIAP的原核表达及穿透血脑屏障功能的鉴定

摘要：

目的 构建pTAT-XIAP原核表达载体,以获得pTAT-XIAP融合蛋白,并研究该融合蛋白穿透血脑屏障的功能.方法 在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,转入大肠杆菌表达菌株BL21plysS进行诱导表达.pTAT-XIAP融合蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western印迹鉴定融合蛋白.pTAT-XIAP融合蛋白腹腔注射SD大鼠体内,免疫荧光法检测在脑组织的分布.结果 表达产物经SDS-PAGE及Western印迹分析后,在64kD处有一明显表达条带,与理论结果相符.免疫荧光法检测,pTAT-XIAP融合蛋白在大脑皮质、基底节等广泛分布.结论 重组融合蛋白pTAT-XIAP成功表达并可穿透血脑屏障,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.

关键词：TAT、XIAP、蛋白表达、血脑屏障

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分类号：Q291

资助基金：2009桂林医学院青年科研启动基金项目ky2008001;桂林医学院博士启动基金项目BS200603

在线出版日期：2011-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：806-808