APP基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的稳定表达

摘要：

目的 构建淀粉样前体蛋白(APP)基因真核表达载体,转染SH-SY5Y细胞,建立稳定转染细胞系.方法 从质粒pcDNAs-APP中经PCR扩增出APP基因,利用DNA重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经酶切和测序鉴定后,脂质体转染法转染SH-SY5Y细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,通过印迹法(Western blot)检测APP的表达. 结果 pcDNA3.1(+)-APP重组体经PCR扩增后片段大小约为2 300 bp,与预期相同.测序结果与目的序列相同,重组体载体构建成功.Western印迹检测到SH-SY5Y细胞中APP的表达. 结论 成功构建pcDNA3.1(+)-APP真核表达载体并稳定转染SH-SY5Y细胞,成功表达了目的基因,为进一步研究阿尔茨海默病分子学机制奠定了基础.

关键词：APP、真核表达载体、阿尔茨海默病

所属期刊栏目：30

分类号：Q291

资助基金：国家科技支撑计划项目2007BAI38B02;吉林省科技发展计划项目20070923

在线出版日期：2011-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：3504-3506