逆转录病毒介导的靶向人Slingshot-1L基因稳定转染人骨髓间充质干细胞系的建立

摘要：

目的 建立过表达该基因的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)稳定转染细胞系.方法 采用密度梯度离心法联合贴壁培养法分离、纯化hMSCs .应用脂质体法将Slingshot-1L 重组逆转录病毒载体pLNCX-Slingshot-1L转染PA317包装细胞,G418筛选,滴度测定.收集病毒上清感染第2代hMSCs,G418筛选,挑选阳性克隆,扩增培养.结果 采用密度梯度离心法联合贴壁培养法成功分离、纯化了hMSCs,应用pLNCX-Slingshot-1L重组逆转录病毒载体转染PA317包装细胞,获得滴度为5×10~8 CFU /L的病毒上清.收集病毒上清感染hMSCs,获得了过表达Slingshot-1L基因的hMSCs.结论 应用Slingshot-1L重组逆转录病毒载体,成功建立了过表达该基因的hMSCs稳定转染细胞系.

关键词：逆转录病毒、稳定转染、干细胞

所属期刊栏目：30

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家863重大专项2004AA205020;国家自然科学基金;吉林省科技厅重大项目20076023

在线出版日期：2010-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：330-332