应用RNAi抑制食管癌细胞端粒酶活性的实验研究

摘要：

目的 研究载体介导RNA干扰技术(RNAi)对人食管癌细胞株ECA109端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)表达及端粒酶活性的抑制作用.方法 设计并构建3条hTERT基因的siRNA 序列干扰质粒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及对照质粒,并将其分别转染ECA109食管癌细胞,应用RT-PCR法观察各转染细胞hTERTmRNA表达水平的改变,末端重复片段扩增-酶联免疫吸附(TRAP-ELISA)方法测定细胞端粒酶活性.结果 与对照质粒比较,转染24 h后,干扰质粒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组细胞端粒酶活性均显著下降(P<0.01);转染48 h后,各干扰质粒的抑制率依次为49%、79%、53%.干扰质粒转染ECA109细胞中hTERTmRNA的表达较对照质粒转染ECA109细胞中hTERTmRNA的表达量显著下降,仅为对照组的55.4 %.结论 成功构建载体介导的hTERT靶向RNA干扰重组体,能有效抑制ECA109细胞端粒酶活性及hTERTmRNA的表达.

关键词：RNA干扰、食管癌、人端粒酶逆转录酶、端粒酶

所属期刊栏目：29

分类号：R735(肿瘤学)

资助基金：河北省自然科学基金资助项目2005000820

在线出版日期：2010-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2027-2029