10.3969/j.issn.1005-9202.2009.11.013
Survivin特异性shRNA表达载体的构建及评价
目的 构建针对人结肠癌细胞系Lovo的高效率沉默Survivin的shRNA表达载体.方法 合成特异性干扰Survivin的小发卡RNA(shRNA)片段,并与pGenesil2 载体连接,构建Survivin干扰载体(pGenesil2-Survivin shRNA).利用脂质体将其转染Lovo细胞,分为正常细胞对照组和3个shRNA干扰组(pGenesil2-Survivin1、2及3),应用荧光显微镜对转染效果进行评价,应用Western印迹和免疫细胞化学法分析转染后Lovo中Survivin的蛋白表达水平.结果 插入片段测序结果与合成shRNA结果一致;转染效率可达70%左右,转染pGenesil2-Survivin shRNA后,3个干扰组的Lovo细胞中Survivin蛋白表达水平均较正常对照组显著降低(P<0.01).结论 成功构建了能高效沉默Survivin的RNAi表达载体;且pGenesil2-Survivin高效抑制结肠癌Lovo细胞中Survivin基因表达.
RNA干扰、生存素、结肠癌、shRNA
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R739.4(肿瘤学)
2009-07-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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