10.3969/j.issn.1005-9202.2008.07.006
整合素αvβ3小干扰RNA载体构建及其对人视网膜血管内皮细胞的干扰效应检测
目的 设计和构建整合素αvβ3(integrin αvβ3)特异性的小干扰RNA表达载体,并初步验证其对靶基因的抑制作用.方法 设计靶点特异性的寡核苷酸,连接到经BamH I-Hind Ⅲ酶切线性化的pGCsilencer2.0-U6质粒上,转染重组质粒到人视网膜血管内皮细胞,通过免疫印迹 (Western印迹) 及逆转录(RT-PCR)实验检测靶基因的抑制情况.结果 成功构建pGCU6-ITGαv和pGCU6-ITGβ3 siRNAs重组质粒,转染人视网膜血管内皮细胞,Western印迹,RT-PCR 结果证实重组质粒在蛋白及mRNA水平均能抑制整合素αvβ3的表达.结论 成功构建了针对整合素αvβ3的siRNA质粒,该质粒可抑制整合素αvβ3 在人视网膜血管内皮细胞中的表达.
RNA干扰、人视网膜血管内皮细胞、整合素αvβ3、转染
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R774.1(眼科学)
2008-06-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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