生肌调节因子和连接蛋白43基因诱导大鼠成纤维细胞分化为肌细胞实验研究

摘要：

目的 探讨转染生肌调节因子(myoblast determination,MyoD)基因和连接蛋白43(Connexin,Cx43)基因的大鼠真皮成纤维细胞(dermal fibroblast,DFs)生物学功能的变化及MyoD和Cx43基因转染DFs细胞治疗心力衰竭的可行性.方法 采用Gateway技术,构建真核质粒表达载体,利用慢病毒(LV)表达系统,将大鼠MyoD cDNA和Cx43 eDNA转入大鼠成纤维细胞中,经Blasticidin筛选培养,通过RT-PCR,Western印迹法等方法检测MyoD及Cx43蛋白及mRNA表达情况,并且通过显微镜观察转染后生长情况,膜片钳技术检测离子电流变化.结果 RT-PCR,Western印迹法检测出MyoD及Cx43蛋白及相应mRNA表达,膜片钳检测到转染后钙离子电流,显微镜观察到基因转染筛选后培养1 W细胞的融合现象,并有多核肌管形成.结论 MyoD和Cx43基因转染使DFs分化为成肌细胞,为进一步研究基因治疗心力衰竭奠定基础.

关键词：生肌调节因子、连接蛋白43、基因转染、成纤维细胞、心力衰竭

所属期刊栏目：28

分类号：R344.13;QZ73(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金30471719;上海市浦东新区优秀学科带头人项目PWR2004-1;上海市"曙光计划"04SG25

在线出版日期：2008-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：417-420