人肺新型抗蛋白酶性保护因子elafin cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建

摘要：

目的 克隆人肺新型抗蛋白酶性保护因子elafin基因cDNA,构建该基因的真核高效表达载体.方法 抽提人肺总RNA进行RT-PCR法扩增,产物由pUCm-T载体装载、DNA测序确定后,用双酶切将Elafin cDNA定向克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1,转化于大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,双酶切鉴定重组质粒.结果 经RT-PCR获得400b的产物,经DNA测序,确定所扩增片段为人elafin基因cDNA,进而成功筛选出真核表达载体pEGFO-N1-elafin.结论 成功构建人elafin基因cDNA真核表达载体,为进一步深入研究慢性阻塞性肺疾病的发病机制奠定了技术基础.

关键词：elafin、真核表达载体、克隆

所属期刊栏目：27

分类号：R331.1(人体生理学)

资助基金：重庆市应用基础研究基金200332

在线出版日期：2007-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：601-603