Ⅰ型胶原酶阶段消化法体外培养、纯化及鉴定大鼠成骨细胞

摘要：

目的 建立科学有效的大鼠成骨细胞体外培养模式,建立成熟合理的体外培养大鼠成骨细胞鉴定程序.方法 采用Ⅰ型胶原酶阶段消化法来消化新生大鼠乳鼠颅骨,来获得成骨细胞进行体外培养、扩增和鉴定.通过绘制成骨细胞生长曲线,倒置相差显微镜进行细胞形态学观察,基质钙结节形成观察;进行钙-钴法碱性磷酸酶(ALP)染色;Ⅰ型胶原免疫组化染色来观察、鉴定大鼠成骨细胞.结果 Ⅰ型胶原酶改良阶段消化法获得的大鼠成骨细胞纯度较高,增殖较快;ALP染色可见体外培养成骨细胞胞浆内棕褐色阳性颗粒;免疫组化法检测Ⅰ型胶原可见成骨细胞胞浆呈棕黄色阳性着色,显微镜计数阳性细胞比例为87.3%;体外培养超过3 w的成骨细胞可见基质钙结节形成.结论 Ⅰ型胶原酶阶段消化法原代培养大鼠成骨细胞是一种科学有效的成骨细胞原代培养方法.

关键词：成骨细胞、原代培养、胶原酶

所属期刊栏目：27

分类号：R813.1(放射医学)

在线出版日期：2007-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：525-527