大鼠Sirt1基因原核表达质粒的构建及融合蛋白表达

摘要：

目的 构建大鼠Sirt1基因重组原核表达质粒pET41-Sirt1,表达其重组蛋白,为进一步研究Sirt1在哺乳动物细胞内的作用奠定基础.方法 根据GenBank中大鼠Sirt1基因序列设计引物,用RT-PCR扩增得到含BamHI/XhoI酶切位点的Sirt1片段,克隆至pGEM-T easy载体后亚克隆至原核表达载体pET41,测序鉴定后,转化宿主菌进行表达、蛋白纯化,SDS-PAGE鉴定.结果 从大鼠脑的mRNA中扩增出特异Sirt1基因片段长506 bp,经酶切鉴定及DNA序列测定,证实pET41-Sirt1重组质粒构建正确,表达融合蛋白分子量约为48 kD.结论 成功构建重组原核表达质粒pET41-Sirt1,并能表达融合蛋白,其分子量大小与预期一致.

关键词：大鼠、Sirt1、基因表达、重组蛋白

所属期刊栏目：27

分类号：T394.3

在线出版日期：2007-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：417-419